Eleonora nacque a Vigevano (PV) il 3 ottobre 1858, figlia di due attori, Vincenzo Duse ed Angelica Cappelletto.

Interprete eccellente del teatro naturalistico, affrontò con grande disinvoltura la drammaturgia di Gabriele d'Annunzio e successivamente fu interprete straordinaria delle eroine ibseniane.

Interpretò un solo film, CENERE (1916).

Morì a Pittsburgh, durante una tournée negli Stati Uniti, il 21 aprile 1924.